實驗時需要注意的5大細節(jié)
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實驗的成功率很重要，而要提高成功率，就必須注意細節(jié)。以下是做實驗需要注意的五大細節(jié)：
一，記錄
人的記憶力是有限的，在做實驗的時候，不可能記住做過的每一步。例如實驗記錄如果不及時寫，第二天就會忘記很多，一周之后就完全忘記了。所以做實驗一定要做好實驗記錄。記錄一要及時，否則就會忘記，最好是隨時記錄。二要詳細，因為一個很小的細節(jié)可能就是實驗失敗或者成功的原因，如果沒有記下這個細節(jié)，實驗出問題了就難以找到原因。例如，做實驗用的試劑是哪一瓶，什么時候配的（尤其是容易失效的試劑），如果是用PBST配的5%BSA，加了0.02%的Sodium Azide抑制微生物生長，就應(yīng)該記錄為5%BSA.PBST.N3Na，而不是5%BSA。三要整潔，如果過于潦草，看起來很不方便，需要找相關(guān)信息的時候就難以找到。配好的試劑做好標簽也是一種記錄，標簽一定要詳細：包括試劑名稱、配置日期、配置者及其它必要信息。在配試劑的時候，為了防止忘記貼標簽的情況，應(yīng)該先貼標簽，再加試劑。電子記錄有易于檢索的優(yōu)點，對于某些重要信息，可以記錄到電子文檔（例如word文檔）里面。
二，核查
很多時候，我實驗失敗的原因是沒有仔細核查，例如沒有核查果蠅的表型，沒有仔細檢查試劑的標簽，沒有核查離心機的轉(zhuǎn)速，沒有檢查heat block的溫度等等。每一個小錯誤都可能導(dǎo)致實驗失敗，所以一定要養(yǎng)成仔細核查的習(xí)慣。具體來說，在加試劑的時候，一定要仔細核查標簽（包括試劑名稱、配置日期），是否有沉淀，顏色是否改變等；使用儀器的時候，要核查設(shè)置，例如溫度、轉(zhuǎn)速、時間設(shè)置等；電泳的時候，要核查是否有氣泡冒出；使用實驗動物的時候，要核查表型等。
三，分裝
諺語說：不要把所有雞蛋都放到同一個籃子里。同樣，在做實驗的時候，有時也不要把所有試劑都放到同一個容器里。分裝有很多好處。第一，保險。可以防止因為污染、變質(zhì)等原因損失全部試劑或者樣品。第二，容易混勻。結(jié)冰的試劑需要全部溶解然后vortex才可以混勻，如果很大體積，有時會等不及全部溶解就開始加樣，會導(dǎo)致濃度不均。一般溶液都是先溶解溶質(zhì)濃度高的，就像是結(jié)冰的汽水一邊融化一邊喝，一開始很甜，最后幾乎沒有甜味了，是因為糖份的存在會降低熔點，含糖量高的先溶解了。分裝后，每一管溶液量小，解凍時容易全部溶解。注意在分裝的時候一定要全部溶解并充分混勻。第三，延長保質(zhì)期。很多試劑都要低溫保存。如果不分裝，每次使用的時候都全部受熱一次，變質(zhì)就會很快。分裝之后，每次使用只有少量試劑受熱，其它的還可以繼續(xù)保持于低溫，可以延長使用壽命。抗體、體積較大的酶、熱不穩(wěn)定的其它試劑等最好分裝保存于-20度或者更低的溫度。
四，混勻
實驗對很多試劑的用量都有明確要求。要保證實驗的成功和可重復(fù)性，必須保證試劑用量一致。用量等于體積乘以濃度，如果溶液不混勻的話，濃度就會不同，即使加樣體積一樣，實際的量也可能不一樣。所以，一定要保證試劑是充分混勻。結(jié)冰的試劑，必須完全溶解才可以使用。容易沉淀的試劑，使用之前必須充分vortex后再快速離心一下才能使用。
五，備份
在《At the bench》一書里，作者說如果實驗室發(fā)生起火等危急情況，首先應(yīng)該搶救的不是試劑，而是實驗記錄。因為有了實驗記錄才可以完成論文。其實，為了防止實驗記錄丟失的情況，可以把實驗記錄掃描為PDF文檔以備份。同時，對于重要的研究數(shù)據(jù)，最好整理成電子文檔例如excel或word文檔，并且養(yǎng)成對自己的電腦文件定期備份的習(xí)慣。此外，質(zhì)粒、轉(zhuǎn)化后的細菌也需要備份。最好備份兩份以降低丟失的概率。
六，順序
有時候需要給很多試管加不同的試劑。這么多試管和試劑，一不小心，就會忘記哪一管或者哪一樣試劑加了沒有。即使是只有兩三個試管，我有時候加了一個樣品，忽然就忘記是加了哪一管了。如果是按字母或者數(shù)字順序加樣的話，在這種情況下，就會清楚是加了哪一管。
具體來說，給試管加樣的時候，按照試管的字母順序，數(shù)字順序排列。例如做同一個質(zhì)粒的酶切，用了四種酶，分別是XbaI，KpnI，BamHI，BsteII，就按照從左至右分別為BamHI，BsteII，KpnI， XbaI的順序排列。把要加的試劑寫在紙上，按照從上至下，從左至右的順序加樣。對于同一個試劑，加一管，就把試管往左、右或者上、下移動一格。電泳時，不同的泳道順序為marker、control、實驗組。如果有多個marker或者control，也按照字母或者順序排列。收集樣品時，按照先時間順序，后字母、數(shù)字順序排列樣品。
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